Спектрофотометрия

Спектрофотометрия - физико-химический метод качественного и количественного анализа веществ, основанный на измерении оптической плотности (светопропускания) проходящего через образец света. Используемые спектры поглощения: ультрафиолет (λ = 200 – 400 нм), видимый спектр (λ = 400 – 760 нм), инфракрасный спектр (λ > 760 нм). 

Возможность измерения в ультрафиолетовой и видимой областях спектра основана на поглощении электромагнитного излучения хромофорами (окрашивающими веществами) и ауксохромными (усиливающие окраску) соединениями.

Для расчетов концентрации исследуемого вещества применяется закон Бугера – Ламберта – Бера:

I₁ = I_0e^kλl, 

где: 

I₀ – исходный световой поток; 

l – толщина среды;

I₁ – световой поток, прошедший через среду l;

k_λ – коэффициент поглощения вещества.

В свою очередь коэффициент поглощения представляет собой:

k_λ = X_λ ⋅ С, 

где: 

X_λ – коэффициент взаимодействия вещества со светом определенной длины волны;

С – концентрация исследуемого вещества.

В зависимости от целей применения и производителей, конструкции спектрофотометров могут серьезно отличаться, но обязательными элементами будут: источник света, монохроматор, отделение для кювет и детектор-регистратор.